Вирус трансмиссивного гастроэнтерита свиней (TGEV) остается серьезной экономической угрозой для свиноводческой отрасли во всем мире, вызывая практически 100% смертность у новорожденных поросят в возрасте до 5 дней. Существующие вакцинные стратегии имеют значительные ограничения: аттенуированные вакцины вызывают опасения в отношении биобезопасности, а традиционные инактивированные препараты, хоть и безопаснее, демонстрируют недостаточную иммуногенность. Ученые предложили новый подход, который может перевернуть ситуацию с профилактикой этого опасного заболевания.
Инновационная технология: самособирающиеся наночастицы
Исследователи разработали оригинальную субъединичную вакцину на основе самособирающихся наночастиц ферритина, которые экспонируют рецептор-связывающий домен (S-RBD) спайкового белка TGEV. Этот подход соединяет преимущества субъединичных вакцин (высокий профиль безопасности) с улучшенной иммуногенностью за счет мультивалентной презентации антигена.
Методология создания такой вакцины включала генетическое слияние S-RBD с N-терминальным концом молекулы ферритина через гибкий линкер. Созданные эукариотические экспрессионные плазмиды использовали для получения рекомбинантных белков в лентивирус-трансдуцированной системе клеток ExpiCHO, что обеспечило масштабируемость производства.
Экспериментальное подтверждение успеха проекта было получено с помощью нескольких аналитических методов. SDS-PAGE и Вестерн-блоттинг показали, что как гибридный конструкт TGEV-S-RBD-FR, так и контрольный каркас ферритина были успешно экспрессированы с прогнозируемыми молекулярными массами 72 кДа и 40 кДа соответственно.
Ключевые доказательства правильной сборки наночастиц были получены с помощью трансмиссионной электронной микроскопии (TEM) и анализа размера частиц. Эти методы подтвердили, что разработанные конструкты самоорганизуются в монодисперсные сферические наночастицы. При этом наблюдалось увеличение диаметра с 15 нм до 25 нм, что убедительно свидетельствует об успешном встраивании и внешней экспозиции доменов S-RBD.
Полученные результаты демонстрируют не только успешную разработку конкретной вакцины против TGEV, но и создание универсальной наночастичной платформы, которая может быть адаптирована для профилактики и других заболеваний свиней. Такой программируемый подход открывает новые горизонты в разработке вакцин нового поколения для ветеринарии.