Эффекты полисахаридов Inonotus obliquus, артемизинина и дигидроартемизинина на репродуктивную систему мышей, инфицированных Neospora caninum

Ключевые результаты

В исследовании оценивалось защитное действие полисахаридов трутовика скошенного (Inonotus obliquus, IOPs), артемизинина (ART) и дигидроартемизинина (DHA) на повреждения репродуктивной системы самцов мышей BALB/c, вызванные инфекцией Neospora caninum.

Основные эффекты препаратов по сравнению с инфицированными контрольными животными:

• IOPs значительно повышали плотность сперматозоидов (p < 0.05) и их подвижность (p < 0.05)
• DHA существенно снижал частоту деформаций сперматозоидов (p < 0.05)
• ART значительно увеличивал подвижность сперматозоидов (p < 0.01)

Все три исследуемых соединения улучшали гистопатологические показатели тестикулярной и эпидидимальной тканей, уменьшали вакуолизацию митохондрий и улучшали индексы органов.

Методология

Исследование было построено на основе экспериментальной модели неоспороза на самцах мышей BALB/c. После перорального введения препаратов измерялись следующие параметры на 7, 14, 21, 35 и 42 дни:

1. Морфологические исследования:

   • Индекс репродуктивных органов
   • Гистопатология тестикул и эпидидимисов методом окрашивания H&E
   • Ультраструктурные изменения с помощью трансмиссионной электронной микроскопии

2. Функциональные анализы:

   • Качество спермы методом улучшенного окрашивания по Папаниколау
   • Апоптоз сперматогенных клеток с помощью проточной цитометрии
   • Активность малонового диальдегида (MDA) и кислой фосфатазы (ACP)

3. Иммунологические исследования:

   • Уровни IgG1, IgG2a, IgE методом ELISA
   • Цитокины IFN-γ, IL-4, IL-6, TNF-α
   • Уровни оксида азота (NO) и антиспермальных антител (AsAb)

4. Молекулярно-генетический анализ с помощью qPCR:

   • Гены апоптоза: Bax, Bcl-2, Caspase-3, P53
   • Гены, связанные со сперматогенезом: C-kit, Plzf, Sycp3, Stra8, Dnajb13, Mrto4, Ipo11

Клиническое значение

Биохимические анализы показали, что в тестикулярной ткани мышей, получавших лечение, наблюдались:

• Снижение уровня малонового диальдегида - маркера оксидативного стресса
• Повышение активности кислой фосфатазы - важного фермента для функции сперматозоидов

Иммунологические исследования подтвердили снижение уровней:

• Иммуноглобулинов IgG1 и IgG2a
• Интерлейкинов IL-4 и IL-6
• Фактора некроза опухоли-α (TNF-α)
• Оксида азота (NO)
• Антиспермальных антител (AsAb)

Анализ экспрессии генов выявил, что:

• IOPs достоверно снижали экспрессию caspase-3, p53 и Dnajb13, при этом повышали экспрессию SYCP3 и Stra8
• ART не вызывал значимых изменений в экспрессии исследуемых генов (p < 0.05)
• DHA заметно снижал экспрессию Dnajb13, но усиливал экспрессию SYCP3, Stra8 и Ipo11

Выводы

Результаты исследования позволяют сделать следующие выводы:

1. Артемизинин (ART) не показал выраженного терапевтического эффекта при инфекции Neospora caninum у самцов мышей.

2. Полисахариды Inonotus obliquus (IOPs) и дигидроартемизинин (DHA) эффективно уменьшали вызванные N. caninum:

   • Блокаду сперматогенеза
   • Нарушения созревания сперматозоидов
   • Структурные дефекты сперматозоидов

3. Механизмы действия IOPs и DHA включают:

   • Антиоксидантные эффекты
   • Иммуномодулирующее действие
   • Антиапоптотические свойства

Полисахариды трутовика скошенного (IOPs) и дигидроартемизинин (DHA) можно рассматривать как перспективные кандидаты для терапии неоспороза, особенно в контексте защиты репродуктивной функции у самцов.