Внеклеточные везикулы (EVs) — это микроскопические «посылки», которые клетки отправляют друг другу для передачи важной информации. Во время беременности они становятся настоящими молекулярными курьерами между плодом и матерью, а их присутствие в крови может рассказать о многом.
Исследователи из Frontiers in Veterinary Science решили выяснить, влияет ли пол будущего теленка и срок беременности на характеристики этих везикул в крови коров. Результаты оказались неожиданными и открывают новые перспективы для ветеринарной репродуктологии.
Мониторинг на протяжении всей беременности
Авторы работы наблюдали за 30 беременными коровами породы ангус на протяжении всего периода стельности. Синхронизацию охоты проводили по протоколу 7-Day CoSynch + CIDR с последующим искусственным осеменением. Беременность подтверждали УЗИ на 30-й день после осеменения.
Особенность исследования — в детальном временном мониторинге. Образцы крови брали каждые 15-30 дней: на 45, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240 и 270 днях беременности. Такая частота позволила отследить динамику изменений везикул практически на всех этапах развития плода.
После отела исследователи разделили образцы на две группы: от коров, которые вынашивали бычков (5 животных), и от тех, кто носил телочек (также 5 животных). Анализ проводили методом нанопроточной цитометрии и электронной микроскопии.
Везикулы остаются стабильными
Результаты анализа показали удивительную стабильность характеристик внеклеточных везикул. Средний размер составил 87-105 нанометров, что классифицирует большинство из них как малые внеклеточные везикулы (sEVs). Диапазон размеров варьировал от 50 до 200 нм.
Главное открытие: ни пол плода, ни срок беременности не влияли на размер везикул. Авторы также не обнаружили четкой закономерности в изменении концентрации EVs на протяжении беременности. Это означает, что характеристики внеклеточных везикул остаются относительно постоянными независимо от гормональных изменений и развития плода.
Для подтверждения природы выделенных частиц исследователи использовали капиллярный вестерн-блот анализ. Они обнаружили присутствие характерных поверхностных белков везикул: CD63, CD9, CD81 и TSG101, что окончательно подтвердило наличие внеклеточных везикул в образцах.
Полученные данные указывают на то, что у крупного рогатого скота циркулирующие внеклеточные везикулы представляют собой преимущественно малые везикулы с устойчивыми характеристиками. Это открытие может иметь важное значение для разработки диагностических методов и понимания межклеточной коммуникации во время беременности у сельскохозяйственных животных.